Приказ основних података о документу

Izolovanje funkcionalne ukupne RNK iz lišća i polena lipe (Tilia cordata)

dc.creatorOgnjenovic, Jana
dc.creatorTantoush, Ziyad Omar
dc.creatorJankov, Ratko
dc.creatorĆirković-Veličković, Tanja
dc.creatorVukmirica, Jelena
dc.date.accessioned2018-11-22T00:21:58Z
dc.date.available2018-11-22T00:21:58Z
dc.date.issued2012
dc.identifier.issn0352-5139
dc.identifier.urihttp://cherry.chem.bg.ac.rs/handle/123456789/1531
dc.description.abstractThe conditions required for the isolation of high quality total RNA from European linden (Tilia cordata) leaves and pollen were determined. Pure total RNA was isolated from linden leaves utilizing a Qiagen plant mini kit, while the total RNA isolated from linden pollen using this method was degraded. Successful isolation of total RNA from both linden pollen and leaves, however, was achieved following TRIzol (TM) preparation of the total RNA. The total RNA isolated using TRIzol (TM) was contaminated with genomic DNA but treatment with the enzyme DNase, in solution or on-column, efficiently removed the genomic DNA. Furthermore, the conditions for the elimination of genomic DNA contamination on-column and isolation of pure total RNA from leaves were optimized. The isolated total RNA from both leaves and pollen was used successfully in first-and second-strand cDNA synthesis reactions and in a reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR), demonstrating that the total RNA isolated using this method was functional. In conclusion, pure and functional total RNA from T. cordata leaves and pollen (27.8 +/- 7.9 mu g g(-1) leaves; 25.7 +/- 1.1 mu g g(-1) pollen) could be obtained and was suitable for application in further molecular biology studies.en
dc.description.abstractUspostavljeni su uslovi za izolovanje ukupne RNK iz lišća i polena evropske lipe (Tilia cordata). Korišćenjem komercijalno dostupnog pribora za izolovanje RNK iz biljaka izolovana je čista ukupna RNK iz lišća lipe, dok je korišćenjem iste metode dobijena degradirana RNK iz polena lipe. Uspešno izolovanje RNK iz lišća i polena je dobijeno korišćenjem TRIzol reagensa. RNK izolovana ovim metodom je kontaminirana genomskom DNK, koja je uspešno eliminisana korišćenjem enzima DNaze. Dalje su optimizovani i uslovi uklanjanja genomske DNK pomoću DNaze. Izolovana ukupna RNK iz oba izvora je dalje uspešno iskorišćena za sintezu prvog i drugog lanca klonske DNK, kao i u reverzno-transkriptivnoj PCR reakciji, dokazujući time da je korišćenjem ovog metoda izolovana funkcionalna ukupna RNK. U zaključku, dobijena je čista i funkcionalna RNK iz lišća i polena T. cordata (27,8±7,9 μg g-1 lišća; 25,7±1,1 μg g-1 polena) koja se može koristiti u daljim molekularno-biološkim istraživanjima.sr
dc.publisherSerbian Chemical Soc, Belgrade
dc.relationinfo:eu-repo/grantAgreement/MESTD/Basic Research (BR or ON)/172024/RS//
dc.relationinfo:eu-repo/grantAgreement/EC/FP7/256716/EU//
dc.rightsopenAccess
dc.sourceJournal of the Serbian Chemical Society
dc.subjectTilia cordataen
dc.subjectleavesen
dc.subjectleavesen
dc.subjectpollenen
dc.subjectpollenen
dc.subjecttotal RNAen
dc.subjecttotal RNAen
dc.subjectRT-PCRen
dc.subjectRT-PCRen
dc.subjectcDNAen
dc.subjectcDNAen
dc.titleIsolation of functional total RNA from Tilia cordata leaves and pollenen
dc.titleIzolovanje funkcionalne ukupne RNK iz lišća i polena lipe (Tilia cordata)sr
dc.typearticle
dc.rights.licenseBY-NC-ND
dcterms.abstractЋирковић-Величковић, Тања; Тантоусх, Зиyад Омар; Вукмирица, Јелена; Огњеновиц, Јана; Јанков, Ратко; Изоловање функционалне укупне РНК из лишћа и полена липе (Тилиа цордата); Изоловање функционалне укупне РНК из лишћа и полена липе (Тилиа цордата);
dc.citation.volume77
dc.citation.issue8
dc.citation.spage1003
dc.citation.epage1012
dc.identifier.wos000308830900003
dc.identifier.doi10.2298/JSC111130018O
dc.citation.other77(8): 1003-1012
dc.citation.rankM23
dc.type.versionpublishedVersion
dc.identifier.scopus2-s2.0-84866241617
dc.identifier.rcubKon_2362


Документи

Thumbnail

Овај рад се појављује у следећим колекцијама

Приказ основних података о документу