Kloniranje glavne proteaze Mpro SARS-CoV-2 u E.coli, heterologna ekspresija, prečišćavanje i razvoj inhibitornog enzimskog eseja za pretragu potencijalnih lekova
Samo za registrovane korisnike
2021
Diplomski rad (Objavljena verzija)
,
Univerzitet u Beogradu - Hemijski fakultet
Metapodaci
Prikaz svih podataka o dokumentuApstrakt
SARS-CoV-2 virus predstavlja globalnu pretnju po javno zdravlje. Postojeće mogućnosti prevencije i lečenja SARS-CoV-2 infekcije su nedovoljne zbog nedostatka efikasne terapije lekovima. Pošto razvoj novog leka predstavlja vrlo dug proces i zahteva velika finansijska ulaganja, prenamena odobrenih farmaceutskih lekova i kandidata za lekove predstavlja alternativni pristup koji omogućava identifikaciju potencijalnih lekova za u cilju brzog odgovora na pandemiju. Glavna proteaza Mpro SARS-CoV-2 ima ključnu ulogu u replikaciji virusa. Zbog važne uloge u životnom ciklusu virusa, proteaza Mpro virusa SARS-CoV-2 predstavlja atraktivnu terapeutsku metu. Metodom informacionih spektara i potom molekulskim dokingom su i ranije predloženi potencijalni inhibitori SARS-CoV-2 glavne proteaze.
Cilj ovog rada je izolovanje i prečišćavanje, a zatim ispitivanje aktivnosti proteaze Mpro SARS-CoV-2 u prisustvu različitih inhibitora.
Plazmid koji sadrži gen za Mpro proteazu je uspešno izolovan i linearizov...an. Mpro proteaza je uspešno eksprimirana u citosolu E. coli STAR ćelija. Merenjem enzimske aktivnosti utvrđena je inhibitorna aktivnost Vit C na Mpro. Takođe je utvrđeno da L-lizin i L-arginin imaju inhibitorno dejstvo na Mpro, ali nije postignuta IC50. Na ovaj način je potvrđena predložena inhibitorna aktivnost jedinjenja selektovanih in silico kao i razvijena metoda za merenje inhibitorne aktivnosti malih molekula na GST-Mpro proteazu virusa SARS-CoV-2.
Ključne reči:
inhibicija / aktivnost / prečišćavanje / izolovanje / SARS-CoV-2 / MproIzvor:
2021, 2-38Finansiranje / projekti:
- COVIDTARGET – Repurposing of drugs for prevention and treatment of Covid-19 (RS-ScienceFundRS-Fond_2020_COVID19-7551100)
Kolekcije
Institucija/grupa
Hemijski fakultet / Faculty of ChemistryTY - THES AU - Đukić, Ivana PY - 2021 UR - https://cherry.chem.bg.ac.rs/handle/123456789/4690 AB - SARS-CoV-2 virus predstavlja globalnu pretnju po javno zdravlje. Postojeće mogućnosti prevencije i lečenja SARS-CoV-2 infekcije su nedovoljne zbog nedostatka efikasne terapije lekovima. Pošto razvoj novog leka predstavlja vrlo dug proces i zahteva velika finansijska ulaganja, prenamena odobrenih farmaceutskih lekova i kandidata za lekove predstavlja alternativni pristup koji omogućava identifikaciju potencijalnih lekova za u cilju brzog odgovora na pandemiju. Glavna proteaza Mpro SARS-CoV-2 ima ključnu ulogu u replikaciji virusa. Zbog važne uloge u životnom ciklusu virusa, proteaza Mpro virusa SARS-CoV-2 predstavlja atraktivnu terapeutsku metu. Metodom informacionih spektara i potom molekulskim dokingom su i ranije predloženi potencijalni inhibitori SARS-CoV-2 glavne proteaze. Cilj ovog rada je izolovanje i prečišćavanje, a zatim ispitivanje aktivnosti proteaze Mpro SARS-CoV-2 u prisustvu različitih inhibitora. Plazmid koji sadrži gen za Mpro proteazu je uspešno izolovan i linearizovan. Mpro proteaza je uspešno eksprimirana u citosolu E. coli STAR ćelija. Merenjem enzimske aktivnosti utvrđena je inhibitorna aktivnost Vit C na Mpro. Takođe je utvrđeno da L-lizin i L-arginin imaju inhibitorno dejstvo na Mpro, ali nije postignuta IC50. Na ovaj način je potvrđena predložena inhibitorna aktivnost jedinjenja selektovanih in silico kao i razvijena metoda za merenje inhibitorne aktivnosti malih molekula na GST-Mpro proteazu virusa SARS-CoV-2. T1 - Kloniranje glavne proteaze Mpro SARS-CoV-2 u E.coli, heterologna ekspresija, prečišćavanje i razvoj inhibitornog enzimskog eseja za pretragu potencijalnih lekova SP - 2 EP - 38 UR - https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_4690 ER -
@misc{ author = "Đukić, Ivana", year = "2021", abstract = "SARS-CoV-2 virus predstavlja globalnu pretnju po javno zdravlje. Postojeće mogućnosti prevencije i lečenja SARS-CoV-2 infekcije su nedovoljne zbog nedostatka efikasne terapije lekovima. Pošto razvoj novog leka predstavlja vrlo dug proces i zahteva velika finansijska ulaganja, prenamena odobrenih farmaceutskih lekova i kandidata za lekove predstavlja alternativni pristup koji omogućava identifikaciju potencijalnih lekova za u cilju brzog odgovora na pandemiju. Glavna proteaza Mpro SARS-CoV-2 ima ključnu ulogu u replikaciji virusa. Zbog važne uloge u životnom ciklusu virusa, proteaza Mpro virusa SARS-CoV-2 predstavlja atraktivnu terapeutsku metu. Metodom informacionih spektara i potom molekulskim dokingom su i ranije predloženi potencijalni inhibitori SARS-CoV-2 glavne proteaze. Cilj ovog rada je izolovanje i prečišćavanje, a zatim ispitivanje aktivnosti proteaze Mpro SARS-CoV-2 u prisustvu različitih inhibitora. Plazmid koji sadrži gen za Mpro proteazu je uspešno izolovan i linearizovan. Mpro proteaza je uspešno eksprimirana u citosolu E. coli STAR ćelija. Merenjem enzimske aktivnosti utvrđena je inhibitorna aktivnost Vit C na Mpro. Takođe je utvrđeno da L-lizin i L-arginin imaju inhibitorno dejstvo na Mpro, ali nije postignuta IC50. Na ovaj način je potvrđena predložena inhibitorna aktivnost jedinjenja selektovanih in silico kao i razvijena metoda za merenje inhibitorne aktivnosti malih molekula na GST-Mpro proteazu virusa SARS-CoV-2.", title = "Kloniranje glavne proteaze Mpro SARS-CoV-2 u E.coli, heterologna ekspresija, prečišćavanje i razvoj inhibitornog enzimskog eseja za pretragu potencijalnih lekova", pages = "2-38", url = "https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_4690" }
Đukić, I.. (2021). Kloniranje glavne proteaze Mpro SARS-CoV-2 u E.coli, heterologna ekspresija, prečišćavanje i razvoj inhibitornog enzimskog eseja za pretragu potencijalnih lekova. , 2-38. https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_4690
Đukić I. Kloniranje glavne proteaze Mpro SARS-CoV-2 u E.coli, heterologna ekspresija, prečišćavanje i razvoj inhibitornog enzimskog eseja za pretragu potencijalnih lekova. 2021;:2-38. https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_4690 .
Đukić, Ivana, "Kloniranje glavne proteaze Mpro SARS-CoV-2 u E.coli, heterologna ekspresija, prečišćavanje i razvoj inhibitornog enzimskog eseja za pretragu potencijalnih lekova" (2021):2-38, https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_4690 .