TY  - THES
AU  - Stojmenović, Nevena
PY  - 2023
UR  - http://cherry.chem.bg.ac.rs/handle/123456789/6099
AB  - Ekstracelularne vezikule, koje omogućavaju međućelijsku komunikaciju, pronašle su primenu u dijagnostici i tretmanu različitih bolesti. Pre nego što se upotrebe u dijagnostičke svrhe ili za isporuku terapeutika, egzozome je neophodno prečistiti iz različitih uzoraka, tehnikama u koje između ostalog spada i imunoafinitetna hromatografija.
Nanoantitela, odnosno fragmenti antitela koji se mogu rekombinantno proizvesti koriste se u dijagnostičke i terapijske svrhe. Ona postaju sve više popularna zbog svoje sposobnosti da prepoznaju antigene nedostupne konvencionalnim antitelima. Upravo kompaktna struktura i visoka stabilnost su im omogućila široku primenu. Stoga nanoantitela se mogu koristiti za prepoznavanje i vezivanje specifičnih antigena na površini ekstracelularnih vezikula, omogućavajući njihovu detekciju i karakterizaciju.
U ovom radu, uspešno je eksprimirano nanoantitelo H6IgM, u ćelijama E. Coli. Ovaj konstrukt je sačinjen od H6 nanoantitela i mišjijeg μ domena IgM antitela. H6 nanoantitelo je prethodno dobijeno direktnom selekcijom iz naivne biblioteke gena na antigenima egzozoma iz ćelijske kulture. H6 je okarakterisano kao anti-CD9 antitelo pa je potom dalje odabrano za dalja kloniranja u cilju proizvodnje konstrukta, koji bi vezivao vezikule iz različitih izvora. Nakon provere ekspresije, SDS-PAGE tehnikom, konstrukt je prečišćen metal-afinitetnom hromatografijom, zahvaljujući C terminalnom histidinskom tagu. Prinos nakon prečišćavanja je iznosio 1,2 mg/L. Gel hromatografijom procenjena je molekulska masa konstrukta na oko 25 kDa u odnosu na standard ( Lizozim 14 kDa). Immunocapture tehnikom, proveren je afinitet H6IgM za vezivanje egzozoma. Potom je protein vezan za polimetilakrilatni polimer i korišćen za izolovanje vezikula iz urina. U eluiranim frakcijama DLS metodom pokazano je prisustvo čestica, a njihov profil je analiziran SDS poliakrilamidnom elektroforezom.
T1  - Ekspresija, prečišćavanje i primena konstrukta H6IgM u imunoafinitetnoj hromatografiji
SP  - 3
EP  - 49
UR  - https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_6099
ER  - 

@misc{
author = "Stojmenović, Nevena",
year = "2023",
abstract = "Ekstracelularne vezikule, koje omogućavaju međućelijsku komunikaciju, pronašle su primenu u dijagnostici i tretmanu različitih bolesti. Pre nego što se upotrebe u dijagnostičke svrhe ili za isporuku terapeutika, egzozome je neophodno prečistiti iz različitih uzoraka, tehnikama u koje između ostalog spada i imunoafinitetna hromatografija.
Nanoantitela, odnosno fragmenti antitela koji se mogu rekombinantno proizvesti koriste se u dijagnostičke i terapijske svrhe. Ona postaju sve više popularna zbog svoje sposobnosti da prepoznaju antigene nedostupne konvencionalnim antitelima. Upravo kompaktna struktura i visoka stabilnost su im omogućila široku primenu. Stoga nanoantitela se mogu koristiti za prepoznavanje i vezivanje specifičnih antigena na površini ekstracelularnih vezikula, omogućavajući njihovu detekciju i karakterizaciju.
U ovom radu, uspešno je eksprimirano nanoantitelo H6IgM, u ćelijama E. Coli. Ovaj konstrukt je sačinjen od H6 nanoantitela i mišjijeg μ domena IgM antitela. H6 nanoantitelo je prethodno dobijeno direktnom selekcijom iz naivne biblioteke gena na antigenima egzozoma iz ćelijske kulture. H6 je okarakterisano kao anti-CD9 antitelo pa je potom dalje odabrano za dalja kloniranja u cilju proizvodnje konstrukta, koji bi vezivao vezikule iz različitih izvora. Nakon provere ekspresije, SDS-PAGE tehnikom, konstrukt je prečišćen metal-afinitetnom hromatografijom, zahvaljujući C terminalnom histidinskom tagu. Prinos nakon prečišćavanja je iznosio 1,2 mg/L. Gel hromatografijom procenjena je molekulska masa konstrukta na oko 25 kDa u odnosu na standard ( Lizozim 14 kDa). Immunocapture tehnikom, proveren je afinitet H6IgM za vezivanje egzozoma. Potom je protein vezan za polimetilakrilatni polimer i korišćen za izolovanje vezikula iz urina. U eluiranim frakcijama DLS metodom pokazano je prisustvo čestica, a njihov profil je analiziran SDS poliakrilamidnom elektroforezom.",
title = "Ekspresija, prečišćavanje i primena konstrukta H6IgM u imunoafinitetnoj hromatografiji",
pages = "3-49",
url = "https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_6099"
}

Stojmenović, N.. (2023). Ekspresija, prečišćavanje i primena konstrukta H6IgM u imunoafinitetnoj hromatografiji. , 3-49.
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_6099

Stojmenović N. Ekspresija, prečišćavanje i primena konstrukta H6IgM u imunoafinitetnoj hromatografiji. 2023;:3-49.
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_6099 .

Stojmenović, Nevena, "Ekspresija, prečišćavanje i primena konstrukta H6IgM u imunoafinitetnoj hromatografiji" (2023):3-49,
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_6099 .

TY  - GEN
AU  - Jakovljević, Danijel
AU  - Savić, Slađana D.
AU  - Savić, Anđela
AU  - Šišaković, Isidora
AU  - Milosavljević, Andrej
AU  - Pećinar, Marina
AU  - Stojmenović, Nevena
AU  - Matejić, Jovana
AU  - Zarić, Nenad M.
PY  - 2021
UR  - http://chem.bg.ac.rs/studorg/
UR  - https://www.facebook.com/pozitroncasopis/
UR  - https://www.instagram.com/pozitroncasopis/
UR  - pozitron@chem.bg.ac.rs
UR  - http://cherry.chem.bg.ac.rs/handle/123456789/4836
AB  - Како је вирус корона и даље актуелна тема, сазнајте хемијски састав вакцина. Уколико се до сада нисте сусрели са људима високим два нанометра, сада се можете упознати са Нанопутанцима. Ако волите књижевност, сазнајте зашто не треба читати књиге. Откријте отров из стреле који убија или пак, лечи. Прочитајте текст о форензици честичног загађења у ваздуху, као и инспиративни интервју са Јасмином Мушовић. Стигао нам је дугоочекивани Закон о студентском организовању – прочитајте шта он студентима заиста доноси. Први дани на факултету никада нису једноставни, те су корисне савете бруцоши добили на семинару СУСФАН. Подсетите се чиме се бави наш Студентски парламент, као и студентске организације у оквиру њега. Од догађаја издвајамо конференцију о хемији животне средине. Не пропустите да прелистате фото-албум студената Dream Team и сазнате нешто о њиховим симпатичним догађајима из лабораторије и атмосфери на вежбама. Уз Ретросинтезу испратите најважнија дешавања у протеклом периоду. Забавите се уз Хемијске мозгалице и Позитиву.
PB  - Универзитет у Београду – Хемијски факултет
T1  - Позитрон - 25
VL  - 25
SP  - 1
EP  - 52
UR  - https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_4836
ER  - 

@misc{
author = "Jakovljević, Danijel and Savić, Slađana D. and Savić, Anđela and Šišaković, Isidora and Milosavljević, Andrej and Pećinar, Marina and Stojmenović, Nevena and Matejić, Jovana and Zarić, Nenad M.",
year = "2021",
abstract = "Како је вирус корона и даље актуелна тема, сазнајте хемијски састав вакцина. Уколико се до сада нисте сусрели са људима високим два нанометра, сада се можете упознати са Нанопутанцима. Ако волите књижевност, сазнајте зашто не треба читати књиге. Откријте отров из стреле који убија или пак, лечи. Прочитајте текст о форензици честичног загађења у ваздуху, као и инспиративни интервју са Јасмином Мушовић. Стигао нам је дугоочекивани Закон о студентском организовању – прочитајте шта он студентима заиста доноси. Први дани на факултету никада нису једноставни, те су корисне савете бруцоши добили на семинару СУСФАН. Подсетите се чиме се бави наш Студентски парламент, као и студентске организације у оквиру њега. Од догађаја издвајамо конференцију о хемији животне средине. Не пропустите да прелистате фото-албум студената Dream Team и сазнате нешто о њиховим симпатичним догађајима из лабораторије и атмосфери на вежбама. Уз Ретросинтезу испратите најважнија дешавања у протеклом периоду. Забавите се уз Хемијске мозгалице и Позитиву.",
publisher = "Универзитет у Београду – Хемијски факултет",
title = "Позитрон - 25",
volume = "25",
pages = "1-52",
url = "https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_4836"
}

Jakovljević, D., Savić, S. D., Savić, A., Šišaković, I., Milosavljević, A., Pećinar, M., Stojmenović, N., Matejić, J.,& Zarić, N. M.. (2021). Позитрон - 25. 
Универзитет у Београду – Хемијски факултет., 25, 1-52.
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_4836

Jakovljević D, Savić SD, Savić A, Šišaković I, Milosavljević A, Pećinar M, Stojmenović N, Matejić J, Zarić NM. Позитрон - 25. 2021;25:1-52.
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_4836 .

Jakovljević, Danijel, Savić, Slađana D., Savić, Anđela, Šišaković, Isidora, Milosavljević, Andrej, Pećinar, Marina, Stojmenović, Nevena, Matejić, Jovana, Zarić, Nenad M., "Позитрон - 25", 25 (2021):1-52,
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_4836 .