@phdthesis{
author = "Penezić, Ana Z.",
year = "2020",
abstract = "Humani serum-albumin (HSA) je najzastupljeniji protein krvne plazme (40-60% ukupnih proteina). Dominantni je antioksidant u cirkulaciji zahvaljujući slobodnoj tiolnoj grupi aminokiselinskog ostatka Cys34, kao i sposobnosti da sa visokim afinitetom veže redoks-aktivne jone. Na reaktivnost tiolne grupe Cys34 utiču brojni faktori, od kojih su promena konformacije HSA molekula usled karbonilacije i vezivanje masnih kiselina (MK), kao i vezivanje bakar(II)-jona za molekul HSA od posebnog značaja za ovu disertaciju. Relevantnost navedenih faktora u dijabetesu tipa II (DM II), kao patološkom stanju za koje je karakterističan karbonilini i oksidativni stres, povećana koncentracija MK i jona bakra u cirkulaciji, su takođe predmet ove disertacije. Konkretni ciljevi bili su da se ispita:1) uticaj reakcije karbonilacije HSA molekula, in vitro i in vivo, na afinitet vezivanja bakar(II)-jona, odnosno da se utvrdi afinitet modifikovanog HSA za vezivanje ovih jona;2) da li i u kom stepenu karbonilacija dovodi do otpuštanja jona bakra iz prethodno nagrađenih bakar(II)-HSA-kompleksa (in vitro);3) efekat istovremenog vezivanja MK (zasićenih ili nezasićenih) i jona bakra(II) za HSA na reaktivnost Cys34 tiolne grupe (određivanjem konstante brzine reakcije), bez prisustva i u prisustvu reagensa za karbonilaciju i4) promena u afinitetu HSA prema jonima bakra in vivo, kod pacijenata sa dijagnozom DM II, kao i da li potencijalno otpuštanje jona bakra iz kompleksa sa HSA (uzrokovano karbonilacijom) kod ovih pacijenata utiče na stvaranje reaktivnih kiseoničnih vrsta, odnosno na promenu u aktivnosti enzima odbrane od oksidativnog stresa.Afinitet HSA prema jonima bakra(II) smanjuje se nakon in vitro karbonilacije metilglioksalom (MG). Karbonilacija HSA-Cu(II)-kompleksa uzrokuje smanjenje sadržaja Cys34 tiolne grupe, konformacione promene HSA molekula, kao i otpuštanje vezanih bakar(II)-jona. Odnos između procenta smanjenja sadržaja slobodne tiolne grupe Cys34 i procenta smanjenja sadržaja HSA-vezanih bakar(II)-jona (R) iznosi 2,12 ± 0,28. Isti odnos (1,96 ± 0,36) dobijen je i prilikom oksidacije Cys34 tiolne grupe, pri kojoj nije došlo do promene konformacije HSA molekula..., Human serum albumin (HSA) is the most abundant protein in human plasma (40-60 % of total protein content). HSA is the main plasma antioxidant due to its Cys34 free thiol group, as well as, its ability to bind redox active ions with high affinity. The reactivity of Cys34 thiol group is influenced by many factors, from which, the change in HSA conformation caused by carbonylation, binding of fatty acids (FA) and binding of copper(II) ions are the most important for this doctoral dissertation. The relevance of these factors to diabetes type II (DMT II), as a pathological state that is characterized by oxidative and carbonyl stress, increased concentration of FAs and copper(II) ions in the circulation, was also the subject of this doctoral dissertation. Therefore, the aims of this dissertation were to examine:1. the influence of HSA carbonylation in vitro and in vivo on its affinity to bind copper(II) ions, i.e. to determine the copper(II) binding affinity of modified HSA;2. if, and in what extent the carbonylation leads to release of copper(II) ions from already formed copper(II)-HSA-complexes (in vitro);3. the effect of concurrent binding of FAs (saturated and unsaturated) and copper(II) ions to HSA on the reactivity of Cys34 thiol group (determination of kinetics constant of Cys34 thiol group reaction with DNTB);4. the change in the HSA-copper(II) binding affinity in vivo, in patients with DMT II, as well as, if the potential release of copper(II) ions from copper-HSA complexes (caused by carbonylation) in these patients leads to generation of reactive oxygen species, i.e.change in the activity of antioxidative enzymes.The affinity of HSA for copper(II) ions is decreased upon in vitro carbonylation with methylglyoxal (MG). Carbonylation of HSA-Cu(II) complexes caused a decrease in the content of Cys34 thiol group, conformational changes in HSA molecule and release of HSA-bound copper(II) ions. The ratio between the percentage of decrease in the Cys34 thiol group content and percentage of decrease in the HSA-bound copper(II) content (R) is 2,12 ± 0,28. The same R (1,96 ± 0,36) was obtained upon aerobic oxidation of Cys34 thiol group, whereas no conformational changes in HSA occurred. It can be concluded that the copper(II) binding affinity (capacity) of HSA, and the release of these ions from HSA-Cu(II) complexes, depends on the redox status of Cys34 thiol group...",
publisher = "Универзитет у Београду, Хемијски факултет",
journal = "Универзитет у Београду",
title = "Humani serum-albumin: karbonilacija, reaktivnost tiolne grupe Cys34 i vezivanje bakar (II)-jona",
url = "https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_nardus_17668"
}
