TY  - GEN
AU  - Ćirković-Veličković, Tanja
AU  - Gnjatović, Marija
AU  - Ćujić, Danica
AU  - Todorović, Aleksandra
AU  - Stanić-Vučinić, Dragana
AU  - Đukić, Teodora
AU  - Mladenović, Maja
AU  - Vasović, Tamara
AU  - Stojadinović, Marija
AU  - Krstić-Ristivojević, Maja
AU  - Jovanović, Vesna
AU  - Simović, Ana
AU  - Radosavljević, Jelena
AU  - Aćimović, Jelena M.
AU  - Radomirović, Mirjana Ž.
AU  - Stojanović, Marijana
PY  - 2023
UR  - http://cherry.chem.bg.ac.rs/handle/123456789/6014
AB  - Нови корона вирус (SARS CoV-2) који се појавио у Вухану 2019. године припада групи једноланчаних РНК вируса [1]. Представља нови инфективни агенс за хуману популацију и веома је брзо детектован у великом броју земаља. Узрочник је респираторних инфекција које могу да буду праћене и веома тешком клиничком сликом. Брзо ширење, одсуство имунитета на овај вирус и одсуство поузданих тестова за детекцију вируса у тренутку избијања пандемије су болест изазвану овим вирусом брзо претворили у здравствени и друштвени проблем највишег приоритета на глобалном нивоу. Иако су највеће биотехнолошке компаније убрзано почеле са развојем и масовном производњом дијагностичких тестова и вакцина, њихова доступност у тренуцима највеће потражње је и даље недовољна, а цене истих су лимитирајући фактор за бољу контролу болести и ширења пандемије [2]. Развој сопствених и одржива производња тестова и вакцина за COVID-19 су од великог друштвеног значаја. Важан предуслов за одрживу производњу тестова је доступност рекомбинантних антигена вируса и могућност производње истих на великој скали за потребе производње домаћих тестова. Овим техничким решењем се описује добијање два кључна антигена новог корона вируса рекомбинантном технологијом и њихова примена у серолошком ЕЛИСА тесту који производи Институт за примену нуклеарне енергије, ИНЕП, као и за добијање реагенаса за детекцију антигена новог корона вируса (специфичних антитела). У првој фази, оптимизоване су секвенце протеина које су подигле осетљивост постојећих серолошких тестова. Иновативност нашег приступа се огледа и у разрађеним експерименталним протоколима за добијање рекомбинантних протеина нуклеокапсида на великој скали, као и у солубилној форми, што олакшава поступак пречишћавања. Избор фрагмента нуклеокапсида који се хетеролого експримира у солубилној форми, а специфично детектује антитела и генерише јак имуни одговор током имунизације животиња (имуногеност) на основу прегледа познатих епитопских секвенци је кључна иновација овог техничког решења. Ово је први пример успешно примењеног рекомбинатног протеина произведеног у Србији у дијагностичком тесту који је регистрован
код Агенције за лекове и медицинска средства Републике Србије (број решења 515-02-02370-21-002), а који је примену нашао и на међународном нивоу.
T1  - Dobijanje rekombinantnog imunogenog fragmenta proteina nukleokapsida SARS-CoV-2 virusa za proizvodnju reagenasa i dijagnostičkih testova na novi korona virus
UR  - https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_6014
ER  - 

@misc{
author = "Ćirković-Veličković, Tanja and Gnjatović, Marija and Ćujić, Danica and Todorović, Aleksandra and Stanić-Vučinić, Dragana and Đukić, Teodora and Mladenović, Maja and Vasović, Tamara and Stojadinović, Marija and Krstić-Ristivojević, Maja and Jovanović, Vesna and Simović, Ana and Radosavljević, Jelena and Aćimović, Jelena M. and Radomirović, Mirjana Ž. and Stojanović, Marijana",
year = "2023",
abstract = "Нови корона вирус (SARS CoV-2) који се појавио у Вухану 2019. године припада групи једноланчаних РНК вируса [1]. Представља нови инфективни агенс за хуману популацију и веома је брзо детектован у великом броју земаља. Узрочник је респираторних инфекција које могу да буду праћене и веома тешком клиничком сликом. Брзо ширење, одсуство имунитета на овај вирус и одсуство поузданих тестова за детекцију вируса у тренутку избијања пандемије су болест изазвану овим вирусом брзо претворили у здравствени и друштвени проблем највишег приоритета на глобалном нивоу. Иако су највеће биотехнолошке компаније убрзано почеле са развојем и масовном производњом дијагностичких тестова и вакцина, њихова доступност у тренуцима највеће потражње је и даље недовољна, а цене истих су лимитирајући фактор за бољу контролу болести и ширења пандемије [2]. Развој сопствених и одржива производња тестова и вакцина за COVID-19 су од великог друштвеног значаја. Важан предуслов за одрживу производњу тестова је доступност рекомбинантних антигена вируса и могућност производње истих на великој скали за потребе производње домаћих тестова. Овим техничким решењем се описује добијање два кључна антигена новог корона вируса рекомбинантном технологијом и њихова примена у серолошком ЕЛИСА тесту који производи Институт за примену нуклеарне енергије, ИНЕП, као и за добијање реагенаса за детекцију антигена новог корона вируса (специфичних антитела). У првој фази, оптимизоване су секвенце протеина које су подигле осетљивост постојећих серолошких тестова. Иновативност нашег приступа се огледа и у разрађеним експерименталним протоколима за добијање рекомбинантних протеина нуклеокапсида на великој скали, као и у солубилној форми, што олакшава поступак пречишћавања. Избор фрагмента нуклеокапсида који се хетеролого експримира у солубилној форми, а специфично детектује антитела и генерише јак имуни одговор током имунизације животиња (имуногеност) на основу прегледа познатих епитопских секвенци је кључна иновација овог техничког решења. Ово је први пример успешно примењеног рекомбинатног протеина произведеног у Србији у дијагностичком тесту који је регистрован
код Агенције за лекове и медицинска средства Републике Србије (број решења 515-02-02370-21-002), а који је примену нашао и на међународном нивоу.",
title = "Dobijanje rekombinantnog imunogenog fragmenta proteina nukleokapsida SARS-CoV-2 virusa za proizvodnju reagenasa i dijagnostičkih testova na novi korona virus",
url = "https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_6014"
}

Ćirković-Veličković, T., Gnjatović, M., Ćujić, D., Todorović, A., Stanić-Vučinić, D., Đukić, T., Mladenović, M., Vasović, T., Stojadinović, M., Krstić-Ristivojević, M., Jovanović, V., Simović, A., Radosavljević, J., Aćimović, J. M., Radomirović, M. Ž.,& Stojanović, M.. (2023). Dobijanje rekombinantnog imunogenog fragmenta proteina nukleokapsida SARS-CoV-2 virusa za proizvodnju reagenasa i dijagnostičkih testova na novi korona virus. .
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_6014

Ćirković-Veličković T, Gnjatović M, Ćujić D, Todorović A, Stanić-Vučinić D, Đukić T, Mladenović M, Vasović T, Stojadinović M, Krstić-Ristivojević M, Jovanović V, Simović A, Radosavljević J, Aćimović JM, Radomirović MŽ, Stojanović M. Dobijanje rekombinantnog imunogenog fragmenta proteina nukleokapsida SARS-CoV-2 virusa za proizvodnju reagenasa i dijagnostičkih testova na novi korona virus. 2023;.
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_6014 .

Ćirković-Veličković, Tanja, Gnjatović, Marija, Ćujić, Danica, Todorović, Aleksandra, Stanić-Vučinić, Dragana, Đukić, Teodora, Mladenović, Maja, Vasović, Tamara, Stojadinović, Marija, Krstić-Ristivojević, Maja, Jovanović, Vesna, Simović, Ana, Radosavljević, Jelena, Aćimović, Jelena M., Radomirović, Mirjana Ž., Stojanović, Marijana, "Dobijanje rekombinantnog imunogenog fragmenta proteina nukleokapsida SARS-CoV-2 virusa za proizvodnju reagenasa i dijagnostičkih testova na novi korona virus" (2023),
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_6014 .

TY  - JOUR
AU  - Lopandić, Zorana
AU  - Protić-Rosić, Isidora
AU  - Todorović, Aleksandra
AU  - Glamočlija, Sofija
AU  - Gnjatović, Marija Lj.
AU  - Ćujic, Danica
AU  - Gavrović-Jankulović, Marija
PY  - 2021
UR  - http://cherry.chem.bg.ac.rs/handle/123456789/4800
AB  - Diagnostic evaluation of specific antibodies against the SARS-CoV-2 virus is mainly based on spike (S) and nucleocapsid (N) proteins. Despite the critical functions in virus infection and contribution to the pattern of immunodominance in COVID-19, exploitation of the most abundant membrane (M) protein in the SARS-CoV-2 serology tests is minimal. This study investigated the recombinant M protein’s immunoreactivity with the sera from COVID-19 convalescents. In silico designed protein was created from the outer N-terminal part (19 aa) and internal C-terminal tail (101–222 aa) of the M protein (YP_009724393.1) and was recombinantly produced and purified. The designed M protein (16,498.74 Da, pI 8.79) revealed both IgM and IgG reactivity with serum samples from COVID-19 convalescents in Western blot. In ELISA, more than 93% (28/30) of COVID-19 sera were positive for IgM detection, and more than 96% (29/30) were positive for specific IgG detection to M protein. Based on the capacity to provoke an immune response and its strong antigenic properties, as shown here, and the fact that it is also involved in the virion entry into host cells, the M protein of the SARS-CoV-2 virus as a good antigen has the potential in diagnostic purposes and vaccine design.
PB  - MDPI
T2  - International Journal of Molecular Sciences
T1  - IgM and IgG Immunoreactivity of SARS-CoV-2 Recombinant M Protein
VL  - 22
IS  - 9
SP  - 4951
DO  - 10.3390/ijms22094951
ER  - 

@article{
author = "Lopandić, Zorana and Protić-Rosić, Isidora and Todorović, Aleksandra and Glamočlija, Sofija and Gnjatović, Marija Lj. and Ćujic, Danica and Gavrović-Jankulović, Marija",
year = "2021",
abstract = "Diagnostic evaluation of specific antibodies against the SARS-CoV-2 virus is mainly based on spike (S) and nucleocapsid (N) proteins. Despite the critical functions in virus infection and contribution to the pattern of immunodominance in COVID-19, exploitation of the most abundant membrane (M) protein in the SARS-CoV-2 serology tests is minimal. This study investigated the recombinant M protein’s immunoreactivity with the sera from COVID-19 convalescents. In silico designed protein was created from the outer N-terminal part (19 aa) and internal C-terminal tail (101–222 aa) of the M protein (YP_009724393.1) and was recombinantly produced and purified. The designed M protein (16,498.74 Da, pI 8.79) revealed both IgM and IgG reactivity with serum samples from COVID-19 convalescents in Western blot. In ELISA, more than 93% (28/30) of COVID-19 sera were positive for IgM detection, and more than 96% (29/30) were positive for specific IgG detection to M protein. Based on the capacity to provoke an immune response and its strong antigenic properties, as shown here, and the fact that it is also involved in the virion entry into host cells, the M protein of the SARS-CoV-2 virus as a good antigen has the potential in diagnostic purposes and vaccine design.",
publisher = "MDPI",
journal = "International Journal of Molecular Sciences",
title = "IgM and IgG Immunoreactivity of SARS-CoV-2 Recombinant M Protein",
volume = "22",
number = "9",
pages = "4951",
doi = "10.3390/ijms22094951"
}

Lopandić, Z., Protić-Rosić, I., Todorović, A., Glamočlija, S., Gnjatović, M. Lj., Ćujic, D.,& Gavrović-Jankulović, M.. (2021). IgM and IgG Immunoreactivity of SARS-CoV-2 Recombinant M Protein. in International Journal of Molecular Sciences
MDPI., 22(9), 4951.
https://doi.org/10.3390/ijms22094951

Lopandić Z, Protić-Rosić I, Todorović A, Glamočlija S, Gnjatović ML, Ćujic D, Gavrović-Jankulović M. IgM and IgG Immunoreactivity of SARS-CoV-2 Recombinant M Protein. in International Journal of Molecular Sciences. 2021;22(9):4951.
doi:10.3390/ijms22094951 .

Lopandić, Zorana, Protić-Rosić, Isidora, Todorović, Aleksandra, Glamočlija, Sofija, Gnjatović, Marija Lj., Ćujic, Danica, Gavrović-Jankulović, Marija, "IgM and IgG Immunoreactivity of SARS-CoV-2 Recombinant M Protein" in International Journal of Molecular Sciences, 22, no. 9 (2021):4951,
https://doi.org/10.3390/ijms22094951 . .