Analiza transglikozidazne aktivnosti α-amilaze iz soja Bacillus paralicheniformis 9945a sa tačkastom mutacijom H235E

Abstract

U poslednje vreme, usled porasta potražnje za zdravijim i ekološki prihvatljivijim izvorima hrane, javila se potreba za oligosaharidnim dodacima ishrani, zbog njihovih prebiotskih i bioprezervativnih svojstava. Oligosaharidi, kao grupa jedinjenja koja se često koristi u ove svrhe, se definišu kao oligomeri monosaharida sa od dve do deset monosaharidnih jedinica. Prebiotski oligosaharidi su nekarcinogeni, nesvarljivi i niske kalorijske vrednosti, i imaju ulogu u stimulisanju rasta zdrave crevne mikroflore. Oligosaharidi igraju veliku ulogu kao sastojci koji mogu da menjaju manje zdrave i isplative sastojke na bazi masnih kiselina, derivata šećera i antioksidanasa. Usled potrebe za povećanom proizvodnjom, pojavila se i potreba za efikasnijim sintetičkim putevima dobijanja oligosaharida. Enzimi, kao prirodni katalizatori su našli primenu u ovom polju industrije, pre svega glikozil-transferaze i transglikozidaze. Razlika između ove dve grupe enzima je u tome što je kod glikozil-transferaza neophodan aktivirani supstrat, što kod transglikozidaza nije slučaj. S obzirom da neke glikozid hidrolaze mogu da se ponašaju kao i transglikozidaze, u α-amilazu iz bakterije Bacillus paralicheniformis je uvedena tačkasta mutacija H235E u cilju povećanja transglikozidazne, a smanjivanja glikozid hidrolazne aktivnosti.