Faculty of Chemistry Repository - Cherry
University of Belgrade - Faculty of Chemistry
    • English
    • Српски
    • Српски (Serbia)
  • English 
    • English
    • Serbian (Cyrillic)
    • Serbian (Latin)
  • Login
View Item 
  •   Cherry
  • Hemijski fakultet
  • Završni radovi
  • View Item
  •   Cherry
  • Hemijski fakultet
  • Završni radovi
  • View Item
JavaScript is disabled for your browser. Some features of this site may not work without it.

Kloniranje fluorescentno obeleženog humanog α-sinukleina u vektore za ekspresiju u bakteriji Escherichia coli

Authorized Users Only
2021
Authors
Savić, Aleksa D.
Contributors
Radosavljević, Jelena
Bachelor Thesis (Published version)
,
Univerzitet u Beogradu - Hemijski fakultet
Metadata
Show full item record
Abstract
Humani α-sinuklein je protein zastupljen u završecima presinaptičkih neurona. Agregati ovog proteina su pronađeni u okviru amiloidnih fibrila i Lewy-jevih tela u mozgovima pacijenata sa Alchajmerovom, Parkinsonovom i drugim bolestima i smatra se da su usko povezani sa etiologijom ovih bolesti. Da bi se ispitale priroda ovog proteina i njegove oligomerizacije in vitro potrebne su velike količine prečišćenog proteina. U ovom radu opisana je konstrukcija vektora za ekspresiju humanog α-sinukleina fluorescentno obeleženog mCerulean3 proteinom sa His6, odnosno His8 tagom i uvedenim proteolitičkim mestom za TEV proteazu, koji nakon digestije oslobađa α-sinuklein sa nativom N-terminalnom aminokiselinom, a polazeći od komercijalno dostupnog pDUET-A- α-sinuclein-mCerulean3 vektora. Za dobijanje ekspresionog konstrukta, prvo je sintetisan insert PCR-om iz više ciklusa, nakon čega su PCR proizvodi subklonirani u pET-20b vektor, a zatim prebačeni u pDUET vektor. Sekvenca inserta u dobijenim kons...truktima je potvrđena sekvenciranjem sa opdgovarajućim prajmerima.

Keywords:
kloniranje / bakterija / Escherichia coli / α-sinuklein / α-sinukclein
Source:
2021, 1-69
Funding / projects:
  • LEAPSyn-SCI - Late Embryogenesis Abundant Proteins: Structural Characterisation and Interaction With Α-Synuclein (RS-6039663)
[ Google Scholar ]
Handle
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_4736
URI
https://cherry.chem.bg.ac.rs/handle/123456789/4736
Collections
  • Završni radovi
  • LEAPSyn-SCI
Institution/Community
Hemijski fakultet
TY  - THES
AU  - Savić, Aleksa D.
PY  - 2021
UR  - https://cherry.chem.bg.ac.rs/handle/123456789/4736
AB  - Humani α-sinuklein je protein zastupljen u završecima presinaptičkih neurona. Agregati ovog proteina su pronađeni u okviru amiloidnih fibrila i Lewy-jevih tela u mozgovima pacijenata sa Alchajmerovom, Parkinsonovom i drugim bolestima i smatra se da su usko povezani sa etiologijom ovih bolesti. Da bi se ispitale priroda ovog proteina i njegove oligomerizacije in vitro potrebne su velike količine prečišćenog proteina. U ovom radu opisana je konstrukcija vektora za ekspresiju humanog  α-sinukleina fluorescentno obeleženog mCerulean3 proteinom sa His6, odnosno His8 tagom i uvedenim proteolitičkim mestom za TEV proteazu, koji nakon digestije oslobađa  α-sinuklein sa nativom N-terminalnom aminokiselinom, a polazeći od komercijalno dostupnog pDUET-A- α-sinuclein-mCerulean3 vektora. Za dobijanje ekspresionog konstrukta, prvo je sintetisan insert PCR-om iz više ciklusa, nakon čega su PCR proizvodi subklonirani u pET-20b vektor, a zatim prebačeni u pDUET vektor. Sekvenca inserta u dobijenim konstruktima je potvrđena sekvenciranjem sa opdgovarajućim prajmerima.
T1  - Kloniranje fluorescentno obeleženog humanog α-sinukleina u vektore za ekspresiju u bakteriji Escherichia coli
SP  - 1
EP  - 69
UR  - https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_4736
ER  - 
@misc{
author = "Savić, Aleksa D.",
year = "2021",
abstract = "Humani α-sinuklein je protein zastupljen u završecima presinaptičkih neurona. Agregati ovog proteina su pronađeni u okviru amiloidnih fibrila i Lewy-jevih tela u mozgovima pacijenata sa Alchajmerovom, Parkinsonovom i drugim bolestima i smatra se da su usko povezani sa etiologijom ovih bolesti. Da bi se ispitale priroda ovog proteina i njegove oligomerizacije in vitro potrebne su velike količine prečišćenog proteina. U ovom radu opisana je konstrukcija vektora za ekspresiju humanog  α-sinukleina fluorescentno obeleženog mCerulean3 proteinom sa His6, odnosno His8 tagom i uvedenim proteolitičkim mestom za TEV proteazu, koji nakon digestije oslobađa  α-sinuklein sa nativom N-terminalnom aminokiselinom, a polazeći od komercijalno dostupnog pDUET-A- α-sinuclein-mCerulean3 vektora. Za dobijanje ekspresionog konstrukta, prvo je sintetisan insert PCR-om iz više ciklusa, nakon čega su PCR proizvodi subklonirani u pET-20b vektor, a zatim prebačeni u pDUET vektor. Sekvenca inserta u dobijenim konstruktima je potvrđena sekvenciranjem sa opdgovarajućim prajmerima.",
title = "Kloniranje fluorescentno obeleženog humanog α-sinukleina u vektore za ekspresiju u bakteriji Escherichia coli",
pages = "1-69",
url = "https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_4736"
}
Savić, A. D.. (2021). Kloniranje fluorescentno obeleženog humanog α-sinukleina u vektore za ekspresiju u bakteriji Escherichia coli. , 1-69.
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_4736
Savić AD. Kloniranje fluorescentno obeleženog humanog α-sinukleina u vektore za ekspresiju u bakteriji Escherichia coli. 2021;:1-69.
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_4736 .
Savić, Aleksa D., "Kloniranje fluorescentno obeleženog humanog α-sinukleina u vektore za ekspresiju u bakteriji Escherichia coli" (2021):1-69,
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_cherry_4736 .

DSpace software copyright © 2002-2015  DuraSpace
About CHERRY - CHEmistry RepositoRY | Send Feedback

re3dataOpenAIRERCUB
 

 

All of DSpaceInstitutions/communitiesAuthorsTitlesSubjectsThis institutionAuthorsTitlesSubjects

Statistics

View Usage Statistics

DSpace software copyright © 2002-2015  DuraSpace
About CHERRY - CHEmistry RepositoRY | Send Feedback

re3dataOpenAIRERCUB