Kit za amplifikaciju signala sekundarnih antitela u indirektnim ELISA esejima imuno-PCR-om

Abstract

Предметни проналазак се односи на област биоаналитике и представља универзални кит за амплификацију сигнала секундарних антитела у ЕЛИСА есејима имуно-ПЦР-ом. Описане су компоненте кита, укључујући маркер нуклеинске киселине који садржи унапред одређену нуклеотидну секвенцу, као и везни молекул способан да са једне стране специфично веже рецептор који није нуклеинска киселина, а који је способан да специфично веже аналит имобилисан на чврстом носачу везивањем за други рецептор који није нуклеинска киселина, и са друге стране да специфично веже маркер нуклеинске киселине. Поступци за специфично откривање присуства маркера нуклеинске киселине у комплексу везног молекула са аналитом, који укључују амплификацију нуклеинске киселине у ПЦР реакцији у реалном времену, и указују на присуство аналита у поменутом узорку, су такође обезбеђени. Предметни проналазак може да буде коришћен за изузетно осетљиву и специфичну детекцију широког спектра анaлита, за који могу да се произведу специфична антитела, у области медицине, прехрамбене индустрије и биотехнологије.

The present invention belongs to the field of bioanalytics and relates to universal kit for amplification of secondary antibodies signal in ELISA assays by immuno-PCR. Kit komponents include nucleic acid marker comprising of predetermined nucleotide sequence, as well as linker molecule, which is on one hand capable of specifically binding non-nucleic acid receptor that is capable of binding to solid surface-immobilized analyte, and on other hand is capable to specifically bind nucleic acid marker. Methods for specific detection of presence of nucleic acid marker in complex with analyte through linker molecule, that include amplification of nucleic acid marker in real-time PCR, wherein the presence of nucleic acid markers indicates presence of analyte in said sample, are also provided. The present invention can be used for sensitive and specific detection of wide range of analytes, for which specific antibodies can be produced, in the field of medicine, food industry and biotechnology.